有很多客戶向我們咨詢ELISA實(shí)驗(yàn)后如何進(jìn)行曲線制作?對于那么多的曲線計(jì)算公式,我們該如何選擇合適的擬合方程呢?恒遠(yuǎn)生物小編給大家總結(jié):ELISA曲線擬合的那些事。
我們一般可以用軟件繪制也可以通過excel進(jìn)行制作。按照科學(xué)分析方法,如果存在奇異點(diǎn)或者污點(diǎn),直接采用線性分析不是很好,要對擬合曲線的幾個(gè)點(diǎn)進(jìn)行取舍,同時(shí)也可以改用雙對數(shù)直線擬合或者四參數(shù)曲線擬合。
那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種:
直線回歸:直線回歸是簡單的回歸模型,也是基本的曲線擬合回歸分析方法,將所有的測試點(diǎn)擬合為一條直線,其擬合函數(shù)方程式為:y=a+bx。但是因?yàn)閷?shí)際實(shí)驗(yàn)中線性好的情況下可能直線回歸可以獲得較為理想的R2值。那么如果直線線性不理想的情況下如何擬合?作為擁有十多年ELISA產(chǎn)品生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的企業(yè),我們會(huì)推薦用戶進(jìn)行多項(xiàng)式擬合來改善直線回歸線性不理想的問題。
第二種二次多項(xiàng)式擬合回歸方程:二次多項(xiàng)式成拋物線狀,開口向下或者向上,在很多ELISA實(shí)驗(yàn)中,擬合近似于二次多項(xiàng)式的升段或者降段,所以使用二次多項(xiàng)式擬合時(shí),取值的范圍都落在曲線的升段或者降段。其擬合函數(shù)方程式為:y=ax2+bx+c
第三種對數(shù)擬合回歸方程:我們將標(biāo)準(zhǔn)品的O.D測值設(shè)為x軸,標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對數(shù)作為y軸,濃度是自變量,O.D.值是因變量進(jìn)行曲線擬合。
第四種是四參數(shù)擬合回歸方程:競爭法和夾心法都可以用到。它的形狀,根據(jù)情況,可能是一個(gè)單調(diào)上升的類似指數(shù),對數(shù),或雙曲線的曲線,也可能是一個(gè)單調(diào)下降的上述曲線,還可以是一條S形曲線。它要求X值不能小于0(因?yàn)橹笖?shù)是實(shí)數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA的反應(yīng)曲線,所以它也成了ELISA中應(yīng)用廣的模型。
曲線擬合方法雖多,要根據(jù)不同類型ELISA本身的特點(diǎn),選擇適合的曲線擬合模型,才能得到合理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般情況下,需要綜合考慮標(biāo)準(zhǔn)曲線的趨勢走向以及R值的大小以及樣本落值情況。
利用Excel四步輕松搞定 ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作!
一步:在Excel表格中輸入濃度和OD值
第 二 步:粘貼”數(shù)字部分貼入ELISA Calc
第 三 步:選擇回歸/擬合模型
第 四 步:由 Y 計(jì)算 X
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司擁有自己的實(shí)驗(yàn)室,備有業(yè)的技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì),對各種生物試劑,細(xì)胞,血清,ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售,實(shí)驗(yàn)提供免費(fèi)代測服務(wù),并提供精湛的技術(shù)服務(wù),如果您有實(shí)驗(yàn)上的問題歡迎來咨詢,為您提供業(yè)的一對一技術(shù)指導(dǎo)。
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